Genetik
DNA, Gen, Chromosom, Genom, Allel, Genotyp, Phänotyp, Mutation, Nukleotid,
Basenpaar, Doppelhelix, Replikation, Transkription, Translation, Genetischer Code, PCR,
Primer, Taq-Polymerase, dNTPs, Template, Thermocycler, Denaturierung, Annealing, Elongation,
Amplifikat, Ct-Wert, Gelelektrophorese, qPCR, Echtzeit-PCR, RT-PCR, Multiplex-PCR,
DNA-Sequenzierung, Klonieren, Gentechnik, CRISPR, SNP, RNA, Plasmid, Restriktionsenzym, Ligase,
Helikase, Vektor, Hybridisierung, Molekularbiologie, Biotechnologie, Forensik, Erbkrankheit,
Genetischer Fingerabdruck
PCR und Elektrophorese
Das Thema Polymerase Kettenreaktion ist seit Jahrzehnten im Rahmenplan in der Oberstufe Biologie implementiert
und hat Bekanntheit in der Corona-Zeit erlangt.
Dank der Genetik- Werkzeugkästen, welche zum Verleih zur Verfügung stehen,
können Sie als Lehrkraft mit den Schülern nachmittags Genetik-Experimente
wie Elektrophorese, PCR, Enzymatik ungefährlich im Fachraum durchführen.
MindMap zum Thema Genetik:
Übersicht über die Themen und Experimente
Fluoreszenz der Gelbanden:
Ein Fluoreszenzfarbstoff, dessen Fluoreszenz durch Interkalation in doppelsträngige DNS verstärkt wird,
lässt unter kurzwelligem Licht (UV-Licht oder blaues Licht) die DNS-Stränge im Gel als einzelne Banden erscheinen.
Angebote:
Verleih von Geräten und Materialien
Bereitstellung von Thermocyclern und Elektrophorese-Kammern, Micropipetten.
Diese können halbjährig ausgeliehen werden. Das Set kann genutzt werden, um gleichzeitig
bis zu 16 PCR Ansätze durchzuführen.
Die benötigten Verbrauchsmaterialien und Reagenzien für PCR-Experimente können ebenfalls preisgünstig erworben werden.
Inhalt des Sets:
1x Thermocycler (16 Slots),2x Elektrophorese-Apparaturen + Beobachtungskammern,2x Gelformkammern + jeweils 2 Kämme,1x 20µl-200µl Micropipette, 5x 2µl-20 µl Micropipetten,
1x 1µL-10µL Micropipette, 8x PCR- Microtube-Ständer,1x großer Labortube-Ständer, 2x Pipettenboxen ( 200µl), 1x Pipettenbox (10µl),1x PCR-Microtubes 100 Stück,
1x Pufferkammereinsatz für Analytische Elektrophorese, 10x Pipettierkarten zum Üben von Pipettieren,
Foto vom Genetik-Werkzeugkasten: Thermocycler, Elektrophorese-Apparaturen, Micropipetten und Verbrauchsmaterialien
Pipettierkarte: Mit der Pipettierkarte kann das Pipettieren mit einer Micropipette am Anfang geübt werden, um dann in der Praxis erfolgreich anzuwenden.
AG-Tutoring und Hilfestellung
•Gibt es eine genetische Ursache dafür, dass ich eher ein Frühaufsteher bin?
•Wie kann ein Organismus biomolekular nachgewiesen werden?
Manche Fragen von Schülern zu biologischen Themen können durch die PCR-Methode beantwortet werden und
am Ende in eine erfolgreiche Jugendforscht-Arbeit münden.
Dreh- und Angelpunkt ist bei der Entwicklung eines PCR-Experimentes
der Entwurf der Primer, um eine gewünschte Gensequenz zu vervielfältigen.
Lehrgang zu Biomolekularen Arbeitsmethoden wie PCR und Gelelektrophorese
Lehrgang für Lehrkräfte, die PCR und Elektrophorese gerne in ihrem Unterricht oder in einer AG anbieten möchten:
Falls Sie praktisches Know-How für PCR und Elektrophorese benötigen,
biete ich auch einen Lehrgang für Sie und Ihre Kollegen an, sodass Sie
in Ihrem Unterricht die PCR und Elektrophorese durchführen können.
Anfrage für einen Lehrgang
Auswahl von Genetik-Experimenten
Lambda-Phage
Das Nachweis des λ-Bacteriophagen in E. coli durch Amplifikation eines Genabschnittes des Head decoration protein D ( 332bp lang an Position 5747-6079).
Dieses Protein spielt als Nanopartikel in der Forschung im Bereich der Nanotechnologie eine wichtige Rolle.
Plasmid des Lambda-Phagen
Nachweis des Lambda-Phagen in E. coli Durch Amplifikation
eines Genabschnittes des Head decoration protein D ( 332bp lang an Position 5747-6079) kann der λ-Bacteriophage nachgewiesen werden.
Die Sequenz des Amplifikats, deren Forward- und Reverse-Primer unterstrichen sind, ist dargestellt.
Literatur:
• J.R. Chang et al.: Phage Lambda Capsids as Tunable Display Nanoparticles , American Chemical Society (2014)
• Q. Yang, C. E. Catalano: Biochemical Characterization of Bacteriphage Lambda Genome Packaging in Vitro , Virology 305 (2003), Seite: 276-287
• Prof. Dr. Diethard Baron, Dr. Jürgen Braun, Andrea Erdmann, Ulf Erdmann, Rudolz Heinze, Dr. Eckhard R. Lucius:
Genetik- Experimentelle Durchführung zu Elektrophorese und PCR mit Lambda-Phage- Grüne Reihe Materialien SII , Schroedel-Verlag ( 2004), Seite: 108 & 112
Arbuskuläre Mykorrhiza-Pilze
Ziel ist es Arbuskuläre Mykorrhiza-Pilzen in Pflanzenwurzeln nachzuweisen und deren Art später zu bestimmen. Die Internal Transcribes Spacer-Region (ITS)- auch Genetische Barcoding-Region genannt-
erlaubt es, Pilze taxonomisch mittels PCR zu bestimmen. Diese Region
beinhaltet die Gene für die konservierten 18 S, 5.8S und 28S rRNA-Gene. Die Bereiche zwischen diesen Genen sind variabel.
Unterschiedliche Pilzproben können mit den universellen Primerpaar
ITS1 und ITS4 nachgewiesen werden ( White et al. 1990) und durch Sequenzierung in ihrer Sequenz gelesen werden.
Dank des mobilen Feldlabors können bei gutem Wetter PCR- und Elektrophorese-Experimente in der freien Natur durchgeführt werden.
Unterschiedliche Pilzproben können durch die Barcoding-Primer ITS1 und ITS4 bestimmt werden.
Dank des mobilen Feldlabors können auch PCR- und Elektrophorese-Experimente bei gutem Wetter draußen
durchgeführt werden.
Versuch zur Charakterisierung von Mykorrhiza-Pilzarten mittels
Restriktionsfragment- Polymorphismen und deren Längenbestimmung.
Kalibriergerade zum Bestimmen der Restriktionsfragmentlängen.
Literaturquellen:
•White, T.J., Bruns, T., Lee, S., and Taylor, J.: Amplification and direct sequencing of
fungal ribosomal RNA genes for phylogenetics,
PCR Protocols: a Guide to Methods and Applications (1990), 18. Auflage, Seite: 315–322
•Mohr Hans, Schopfer Peter: Pflanzenphysiologie , Springer- Lehrbuch (1992), 4. Auflage, Seite: 591
•Arthur Schüßler: Struktur, Funktion und Ökologie der arbuskulären Mykorrhiza , Rundgespräche der Kommission für Ökologie, Bd. 37
erschienen im Verlag Dr. Friedrich Pfeil, München (2009), Seite: 97-108
•Ebel Mathias, Erdmann Andrea, Erdmann Ulf, Müller Ole, Reichl Joachim: Grüne Reihe- Ökologie , Schroedel-Verlag (2013), Seite: 40-41
Weitere Experimentiersets:
-Genetically modified Organisms ( Klassenset)
-Biobits ( Zellfreie Proteinexpression)
-Sleep Lab ( Früh oder Spätaufsteher?)
Analytische Elektrophorese auf Cellulose, Celluloseacetat, Polykieselsäure
Mit der Elektrophorese kann auch eine Trennung auf anderen Medien wie Papier durchgeführt werden,
und so im Chemieunterricht die Trennung von geladenen Aminosäuren, und anderen kleineren Molekülen
wie Farbstoffen durchgeführt werden. Die Mobilität hängt vom pH-Wert ab( siehe andere Beiträge hierzu).
Anthocyan-Farbstoffe sind bekanntlich pH-Indikatoren und ändern ihre Nettoladung, was ihren Einsatz in der Eltektrophorese interessant macht.
Alternativ kann auch eine Gel- oder Kieselgel-Elektrophorese durchgeführt werden.
Laufzeit: 1 Std; pH 8 Phosphatpuffer; M: Methylenblau; W: Weintraubenextrakt ( Anthocyanfarbstoff); R: Rosenextrakt; B: Bromcresolpurpur; F: Fuchsin;